什么是乙醇沉淀法?
乙醇沉淀也叫做醇沉法,是一個通過添加乙醇,從鹽溶液中脫出想要物質的DNA提取過程。DNA是兩個帶負電荷磷酸鹽糖骨架,沿核酸成鍵的雙螺旋,因此鈣或鈉等帶正電離子能被吸引到它的骨架。離子鹽和DNA都容易溶于水,但很難溶解于乙醇,因為它們都需要水等極性溶劑才能分解。因此,在鹽溶液中添加乙醇,會導致DNA形成顆粒,并從溶液沉淀出來。
DNA是一種極性分子。根據相似相溶原理,極性分子也容易溶解于極性溶劑。盡管容易溶解于水,但DNA不能溶于乙醇等較不極性的溶劑。乙醇仍然是極性分子,但它具有短的非極性碳鏈。正是這一極性的微小差異讓乙醇發生沉淀,原因就是DNA不像水一樣容易溶解于乙醇。
如果實驗者在溶解DNA的水溶液中直接添加乙醇,分子不會沉淀。這是因為DNA仍然被水的極性分子包圍,并且乙醇上的極性基團可以像盾牌一樣,將帶電荷DNA與不帶電荷乙醇碳鏈分離開來。在該過程中,鹽被證實是一個重要因素。
在添加乙醇之前,先將鹽加入溶液,能將DNA從對水的依賴(極性屏障)中解脫出來。鹽的正元素(水中游離和自由浮動的帶正電荷離子)被帶負電荷的DNA強烈吸引。這種鹽吸引導致DNA變成被這些離子吸引,而不是被水分子的正極性吸引,因此在添加乙醇等低極性溶劑時很容易讓其從水中沉淀出來,
通過讓鈣或其它正電荷離子被吸引到DNA上,然后通過增加乙醇減少水成分而使鹽從溶液沉淀出來,科學家就能從溶液中取出DNA。許多研究依賴DNA分離,以及基因篩選和蛋白質表達的處理方法,因此許多實驗者把乙醇沉淀視為一種寶貴的科學工具。
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作者:Riley.Chou
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